高效液相色谱仪在使用时应注意什么

2024-11-14 12:49:51
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回答1:

1、在用紫外吸收检测器时,所用流动相应符合紫外分光光度法项下对溶剂的要求。

2、各品种项下规定的条件除固定相种类、流动相组分、检测器类型不得任意改变外,其余如色谱柱内径、长度、固定相牌号、载体粒度、流动相流速、混合流动相各组分的比例、柱温、进样量、检测器的灵敏度等,均可适当改变。

3、一般色谱图约于20分钟内记录完毕,以适应具体品种并达到系统适用性试验的要求。

4、如所用流动相为含盐流动相,反相色谱柱使用后,先用水或低浓度甲醇水(如5%甲醇水溶液),再用甲醇冲洗。

5、不要在高温下长时间使用硅胶键合相色谱柱。

6、流动相应选用色谱纯试剂、高纯水或双蒸水,酸碱液及缓冲液需经过滤后使用,过滤时注意区分水系膜和油系膜的使用范围。

7、水相流动相需经常更换(一般不超过2天),防止长菌变质。

扩展资料

高效液相色谱更适宜于分离、分析高沸点、热稳定性差、有生理活性及相对分子量比较大的物质,因而广泛应用于核酸、肽类、内酯、稠环芳烃、高聚物、药物、人体代谢产物、表面活性剂,抗氧化剂、杀虫剂、除莠剂的分析等物质的分析。

HPLC与经典液相色谱相比有以下优点:

速度快——通常分析一个样品在15~30 min,有些样品甚至在5 min内即可完成。

分辨率高——可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果。

灵敏度高——紫外检测器可达0.01ng,荧光和电化学检测器可达0.1pg。

色谱柱可反复使用——用一根色谱柱可分离不同的化合物。

样品量少,容易回收——样品经过色谱柱后不被破坏,可以收集单一组分或做制备。

参考资料来源:百度百科-高效液相色谱

回答2:

  高效液相色谱仪在使用时应注意:
  1. 样品溶液无机械杂质;
  2. 手动进样:有效清洗注射器,有效排除气泡,准确定量,进样阀切换要快,进样完毕用超纯水清洗进样阀;
  3. 自动进样:保证样品溶液足够的深度(以免针尖不能埋到液面下);保证样品溶液没有气泡,特别是用插管的情况;瓶盖松紧得度,太松样品溶剂挥发,太紧瓶垫变形可能脱落;不同太旧的瓶垫,以免导致针扎时碎屑堵塞针孔。

回答3:

高效液相色谱仪在使用时应注意一下几点:

首先是实验室环境,实验室的温度过高过低,潮湿,电压波动,阳光直射等,都会造成仪器性能不稳定和或结果偏差。

其次是实验用到的试剂耗材需要选择HPLC级的专用试剂或者对应配件,否则容易造成设备损坏,如果流动相使用到高浓度添加剂或者极高或极低的pH,一定需要确定仪器和色谱柱是否能耐受此类溶剂,如果流动相用到缓冲盐,需要对流动相进行必要的过滤。

最后是样品,样品在进样前应当确保溶液澄清,以防堵塞管路或色谱柱,除此之外,溶解样品的溶剂应该与流动相有兼容性,确保不会对对实验及仪器造成不良影响。

回答4:

回答5:

更换流动相时,必须按照规定的程序进行,否则可能会出现问题,改变流动相有三种情况:互溶性的流动相的更换、无互溶性的流动相的更换和缓冲溶液的更换,在第一种情况下,使用准备更换的流动相完全清洁吸滤器,然后打开仪器的排水阀并按下清洗按钮清洁泵中的流动相。其他还不止这些,你可以看看瑞析-科-&技,到他们那看看,可以找到更多的内容