答案两要点其实我做载体构建两基本侧略平末端连接粘性末端连接第种采用粘性末端连接策略通平末端目片段两端别加含EcoRIXhol酶切位点接序列用两种内切酶别目片段载体做双酶切收酶切载体目片段并连接第二种采用平末端连接策略直接载体双酶切用DNA聚合酶补平所产粘性末端目片段直接进行平末端连接