首先 不管是前引物还是后引物，都得在设计引物时在5'端加一段保护序列（网上搜保护序列 有很多）其次 在保护序列之后要加酶切位点（网上搜酶切位点）然后 后引物还要加终止密码子（3个随便加）最后 目的基因前后的序列按5'到3'的顺序分别加在前后引物上
