流式细胞术

童鞋你这是个100分问题啊亲。。。

BD Accuri C6 我没有用过，我找到的laser和filter信息如下，假定你用的是标准配置（红框内）

你挑选的4个荧光已经分布到4个不同的通道，貌似可以共染色然后同时读取。 具体有一些特别注意的地方分析如下：

1。efluor660的发射光谱同670LP filter的波段有严重重叠但是因为FL3和FL4由不同laser激发，我认为不会造成问题。

2。FITC与PE-Cy7都会有信号泄露到FL2 PE的通道。FITC与PE的共染色是常见的，compensation必做，可以解决问题。但考虑到它们全用同一个laser，这里PE激发效率本来也只有50-60%，PE-Cy7又是一个效率不高的tandem dye，恐怕会泄露过来很多PE信号。这种情况下，我真的不知道能否靠compensation来解决问题。

建议是楼主只做PE与PE-Cy7的双染色预实验（需要空白及两种单染色对照），测试compensation的效果。如果没问题可以实施原本实验计划。

当然，如果楼主抗体还没有买好，还能改荧光，我建议买CD8-PerCP，直接不用做PE对它的compensation了啊啊啊啊啊。

以上是个人在理论上的理解，实际经验并不太多，欢迎网友指正。

以上光谱来自于ebioscience FluorPlan Spectra Viewer.