加尾法是采用加A酶先对mirna进行加尾,然后再用带oligodt的引物反转录,他的反转录引物是通用的,一次反转录可以获得所有miRNA的cdna,效率高。
茎环法是采用特异性反转录引物序列+颈环结构作为反转录引物进行反转录的,一次反转录只能获得一种mirna的cdna,可能有几种一起反转录的,这个不太清楚一起反转录的效果。
然后茎环法的经典即ABI的探针法定量试剂盒。
用过茎环法反转录+染料法定量的,下游引物为通用引物,结果不太好,就现在用的这家的他采用的是双向引物都是特异性的,效果还可以。