供体菌相应位点的染色体没有交换到受体菌上,而且受体菌本身不能被该选择性培养基选择,可以再做一组供体菌的对照试验,看看能不能生长,这种转化本身发生频率就很低,样本一定要多。
用的是蓝白斑筛选,白斑为插入目的基因片段的转化子,蓝斑则没有,挑取白色单菌落摇菌进行pcr检测验证。百度蓝白斑筛选。
扩展资料:
大量提取的质粒DNA一般需进一步纯化,常用柱层析法和氯化铯梯度离心法。常使用的所有纯化方法都利用了质粒DNA 相对较小及共价闭合环状这样两个性质。例如,用氯化铯-溴化乙锭梯度平衡离心分离质粒和染色体DNA就取决于溴化乙锭与线状以及与闭环DNA分子的结合量有所不同。
参考资料来源:百度百科-质粒DNA纯化
供体菌相应位点的染色体没有交换到受体菌上,而且受体菌本身不能被该选择性培养基选择。
你可以再做一组供体菌的对照试验,看看能不能生长。
这种转化本身发生频率就很低,样本一定要多。