苯酚硫酸法测定总糖和dns法测定还原糖的区别

2025-03-03 06:09:38
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回答1:

用苯酚-硫酸法测定糖的原理是使多糖在浓硫酸条件下先水解成单糖并脱水,然后再加入苯酚,苯酚与脱水后的单糖缩合形成有色化合物,在490nm处有最大吸收,在一定范围内其吸光度值和糖的浓度成正比,即可用吸光光度法分析出处理后的溶液中单糖的含量。根据以上原理可知苯酚-硫酸法测定的实际上是总糖。
DNS 法为在NaOH和丙三醇存在下,3,5-二硝基水杨酸(DNS)与还原糖共热后被还原生成氨基化合物。在过量的NaOH碱性溶液中此化合物呈桔红色,在540nm波长处有最大吸收,在一定的浓度范围内,还原糖的量与光吸收值呈线性关系,利用比色法可测定样品中的含糖量。

回答2:

不管你的DNS试剂是如何配制的,只要在绘制糖标准曲线和测定时用的DNS试剂是一样的,就不会对结果有影响. DNS与还原糖共热后生成棕红色的氨基化合物,在一定范围内还原糖含量与反映液的颜色强度成正比.利用比色法可测定样品中还原糖和总糖含量.

回答3:

DNS测总糖要先水解成单糖,苯酚-硫酸法是利用多糖在硫酸的作用下先水解成单糖,并迅速脱水生成糖醛衍生物,然后与苯酚生成橙黄色化合物。再以比色法测定。