.常用的重组DNA分子导入原核宿主细胞的方法有几种?并分析其优缺点。 比较大肠杆菌、植物和动物三种不同系

2025-03-26 18:34:12
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回答1:

一般就是电穿孔法或化学转化法,或者你用噬菌体也行。

大肠杆菌系统是原核表达系统中比较成熟的一种。大肠杆菌的遗传背景和生理生化特性为人们所熟悉 ,宜于进行基因操作 ,生产技术简便 ,生产成本低廉 ,是目前使用广泛的表达体系。但是,由于大肠杆菌内不存在翻译后修饰等机制,所以大量表达的外源性蛋白通常为胞浆内不溶性、 无功能的包含体 ,需要经过变性复性等处理 ,才能使其成为有功能的可溶性蛋白。

植物能够进行光合作用,容易大规模生产,成本低廉。植物为外源蛋白的表达提供了真核蛋白质修饰场所,允许表达蛋白的正确折叠及转录后修饰。植物体只表达病原菌的部分免疫蛋白,不含致病微生物或潜在致病微生物,合成的外源蛋白相对比较安全。而且植物转基因操作和克隆技术比较成熟。但是,植物外源蛋白表达水平低,重组蛋白质中糖链结构会发生改变,对植物生产的表达产物进行提纯,下游生产费用昂贵。

虽然哺乳动物细胞产品表达量低 ,大规模培养复杂 ,但因其生物学特性更接近于人体天然产物 ,特别是对人体的免疫原性远低于原核等其它系统的同类产品 ,成为目前生物技术产品重点研发的系统。

回答2:

难道是同一门课?我也在找答案,可惜可惜,没有人回答的完整啊