做表达用的引物（比如实时荧光定量PCR）一般是根据基因的cDNA序列设计，扩增的片段最好在80-150 bp范围，而且要求特异性要高，退火温度一般设置在60度左右，引物扩增效率要高；做克隆用的引物要求相对宽松，只要能够得到目的基因就可以了。
