his Tag蛋白纯化如何去除杂带

2024-10-31 02:18:53
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回答1:

在的镍柱特异性的吸附蛋白一端的His tag,之后咪唑竞争性的将蛋白洗脱下来,这个过程这His tag始终还在蛋白的结构上。除非在蛋白和tag之间有酶切位点,用某种蛋白酶切除后才能去掉His tag.

回答2:

优化纯化操作步骤,

  1. 清洗杂蛋白的操作;

  2. 清洗杂蛋白的低浓度咪唑;

  3. 洗脱目的蛋白的高浓度咪唑。