叶绿素a和b在蓝光区也有吸收峰,能否用这一吸收峰波长进行叶绿素a和b的定量分析,

2024-11-18 23:50:42
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回答1:

定量分析的吸收峰必须要稳定,还要有强的吸收。另外,还需要考虑干扰的问题。有关叶绿素定量分析方法很多,因此,在有其它灵敏方便的定量分析方法的情况下,一般不考虑这个吸收峰。

如果溶液中有多种吸光物质,则此混合液在某一波长下总吸光度等于各组分在相应波长下吸光度的总和,这就是吸光度的加和性。本实验测定提取液中叶绿素a、叶绿素b和类胡萝卜素的含量,只需测定该提取液在三个特定波长下的。


扩展资料:

叶绿素测定方法:

叶绿素含量的测定方法主要有紫外分光光度法、荧光分析法、活体叶绿素仪法、光声光谱法和高效液相色谱法。不过目前应用最为广泛的还是分光光度法。

叶绿素提取液的吸收光谱表明:有两个强吸收峰,分别在红光区和蓝紫区,不同提取溶剂和原料所得的叶绿素溶液的吸收光谱比较相似。

叶绿素a、叶绿素b的红区最大吸收峰分别在663nm、645nm附近,在蓝紫区分别为429nm、453nm附近。由于提取溶剂和原料不同,对叶绿素提取液进行光谱扫描后,所得的最大吸收值可能有较小范围的浮动。

高效液相色谱(HPLC)定量检测叶绿素含量准确率较高,效果很好。用甲醇和丙酮作为流动相,体积比为80:20时,同时在流动相中加入质量分数为0.1%的冰醋酸,流速为1.0mL/min。利用每一种色素的色谱峰面积进行定量,叶绿素a、叶绿素b的定量可通过外标法由工作曲线求得。

参考资料来源:百度百科-叶绿素

参考资料来源:百度百科-定量分析法



回答2:

如果溶液中有多种吸光物质,则此混合液在某一波长下总吸光度等于各组分在相应波长
下吸光度的总和,这就是吸光度的加和性。本实验测定提取液中叶绿素a、叶绿素b 和类胡
萝卜素的含量,只需测定该提取液在三个特定波长下的吸光度A,并根据叶绿素a、叶绿素
b 及类胡萝卜素在该波长下的吸光系数即可求出其浓度。在测定叶绿素a、叶绿素b 时,为
了排除类胡萝卜素的干扰,所用单色光的波长应选择叶绿素在红光区的最大吸收峰。

回答3:

叶绿素a和b在蓝光区确实有吸收峰,但是这个吸收峰的波长并不能用于叶绿素a和b的定量分析。
这是因为叶绿素a和b在蓝光区的吸收峰波长非常接近,难以通过简单的光谱方法进行区分。此外,叶绿素a和b的吸收光谱在其他波长区域也有重叠,这使得它们之间的定量分析更加困难。
因此,通常使用可见光区的吸收光谱进行叶绿素a和b的定量分析,例如在663和675纳米处的测量它们的的光吸收。