多聚酶链式反应中底物的作用是什么?

2025-03-06 12:31:19
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回答1:

PCR 底物包括7种基本成分:模板DNA、特异性引物、 热稳定DNA聚合酶、脱氧核苷三磷酸(dNTP)、 二价阳离子、缓冲液及一价阳离
模板DNA:包括基因组DNA、质粒DNA、噬菌体DNA、预先扩增的DNA、cDNA和mRNA分子等几乎所有形式的DNA和RNA都能成为PCR技术反应的模板。除此之外,PCR反应还可以直接以细胞为模板。
特异性引物:是一段与模板DNA链结合的寡核苷酸片段,对于DNA的扩增起到引发的作用。
热稳定DNA聚合酶:这是PCR技术实现自动化的关键。热稳定DNA聚合酶是从两类微生物中分离的:一类是嗜热和高度嗜热的真细菌,另一类是嗜热古细菌。现在又出现了一种兼顾了几种DNA聚合酶特点的混合型酶。
脱氧核苷三磷酸(dNTP):是DNA合成的原料,包括dATP、dGTP、dTTP、dCTP。
二价阳离子:常用到Zn2+和Mg2+,作为构成热稳定性DNA聚合酶的成分之一。
缓冲液:一般使用Tris-Cl缓冲液,标准的为10mmol/L,并将其调节到8.3~8.8之间。
一价阳离子:一般使用50mmol/L的KCl溶液,有利于改善扩增的产物质量。

回答2:

亲,你说的不就是PCR嘛,DNA复制是半保留复制,底物当然是提供模板链啦