将36.4g CuSO4.5H2O溶于200mL水中，用0.5mL浓硫酸酸化，再用水稀释到500mL待用；取173g酒石酸钾钠KNaC4H4O6.4H2O，71g NaOH固体溶于400mL水中，再稀释到500mL，使用时取等体积两溶液混合。
斐林试剂使用时，先等体积混合甲、乙两液，而后立即使用，反应需要加热（有时不加热也反应）
甲乙液混合均匀，甲液量较多，乙液只需少量。然后再注入）。【人教版高一生物必修一第十八页说的是“甲乙液等量混合均匀后再注入】这里又牵涉到利用斐林试剂鉴定时，斐林试剂甲和斐林试剂乙直接反应生成酒石酸络铜离子的问题，我们都知道要生成酒石酸络铜离子，需要大量酒石酸离子，这样就只需要少量铜离子，这也就是为什么是将乙液倒入甲液的原因，如果顺序相反就会因为溶液中酒石酸离子不够而先生成氢氧化铜沉淀，最后导致实验失败了。
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