A、人的胰岛素基因在细胞核中，因此转录发生在细胞核中，而翻译发生在细胞质中的核糖体上，A错误；B、DNA连接酶能够两个DNA片段之间的磷酸二酯键，B正确；C、通过检测，大肠杆菌中没有胰岛素产生只能确定目的基因没有翻译成蛋白质，不能判断重组质粒未导入受体菌，C错误；D、获得目的基因的工具酶有限制性核酸内切酶和DNA连接酶，D错误．故选：B．
