1.首先要确定你的taq酶基因,表达的taq酶有没有5`---3`端的外切酶活性;2.其次用于定量PCR的taq本身纯度要求非常高,降低定量PCR的干扰;3.taq酶体系的优化影响也非常大,主要体现在buffer中成分荧光PCR对Taq的要求与普通的对比没那么大的差别,普通能扩的很好,拿到荧光PCR再差也不会什么都没有,关键是看你的染料是不是加多了,SYBR里面的DMSO是会抑制反应的,一定注意好的用量