高速凌晨两点到五点小车可以走，但长途客运车辆需要停止运行或实行接驳运输。
《道路旅客运输企业安全管理规范》中规定：
第三十八条 客运企业在制定运输计划时应当严格遵守客运驾驶员驾驶时间和休息时间等规定：
（一）日间连续驾驶时间不得超过4小时，夜间连续驾驶时间不得超过2小时，每次停车休息时间应不少于20分钟；
（二）在24小时内累计驾驶时间不得超过8小时；
（三）任意连续7日内累计驾驶时间不得超过44小时，期间有效落地休息；
（四）禁止在夜间驾驶客运车辆通行达不到安全通行条件的三级及以下山区公路；
（五）长途客运车辆凌晨2时至5时停止运行或实行接驳运输；从事线路固定的机场、高铁快线以及短途驳载且单程运营里程在100公里以内的客运车辆，在确保安全的前提下，不受凌晨2时至5时通行限制。
客运企业不得要求客运驾驶员违反驾驶时间和休息时间等规定驾驶客运车辆。企业应主动查处客运驾驶员违反驾驶时间和休息时间等规定的行为，发现客运驾驶员违反驾驶时间和休息时间等规定驾驶客运车辆时，应及时采取措施纠正。
扩展资料
《国家安全生产监督管理总局关于进一步加强和改进道路客运安全工作的通知》中规定：
第五条 严格客运车辆道路通行管理
（一）加强道路通行秩序管理。公安部门要加强客运车辆道路通行秩序管理，严格查处客运车辆超员、超速行驶、疲劳驾驶等交通违法行为。
（二）严格夜间通行管理。交通运输部门要严格客运线路审批，对夜间途经达不到夜间安全通行条件的三级（含）以下山区公路，不得批准客运班线。
公安部门在道路执法中发现客运班线夜间途经达不到夜间安全通行条件的三级及以下山区公路的，要禁止通行，并及时通报交通运输部门，由交通运输部门督促客运企业合理调整客运班线的发车时间。
（三）防止疲劳驾驶。客运车辆每日运行里程超过400公里（高速公路直达客运超过600公里）的，客运企业应当配备两名以上驾驶员。驾驶员连续驾驶不得超过4小时，或者24小时内累计驾驶不得超过8小时。客运企业要制定更加严格的防止疲劳驾驶措施，创造条件安排长途驾驶员落地休息。
（四）强化客车运营管理。客运企业要采取有效措施，强化客车运营管理。班线客车要严格按照许可的线路、班次、站点运行，在规定的途经站点上下旅客，不得站外上客或揽客。客运包车不得搭乘合同外的旅客，严禁客运包车途中上客。
参考资料来源：中国政府网-三部门关于印发《道路旅客运输企业安全管理规范》的通知
1.高速公路凌晨两点到五点禁止行驶的车是大客车；
2.小车在凌晨两点到五点之间可以在高速公路通行；
3.高速道口一般设置“客运车辆凌晨2时至5时禁止通行”禁令标志，凌晨2点至5点，高速全面禁止长途客运车辆进入或行驶，高速公路停止对客运车辆发放通行卡，不开放ETC通道，如果在这个时段(凌晨2点到5点)发现客运车辆还在行驶，一律按照“违反禁令标志通行”的规定予以处罚，并在确保安全的前提下，引导车辆就近到城区站、场和服务区停车休息，至凌晨5时后方可继续运行。
4.客车违反凌晨2时至5时通行交通违法行为：根据《道路交通安全法》的相关规定：大客车违反夜间2点到5点行驶的禁令，处扣3分，罚款2000元。
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