A、限制性内切酶和DNA连接酶都作用于磷酸二酯键（a处），其中限制性内切酶可以切断a处，DNA连接酶可以连接a处，A正确；B、DNA聚合酶能将单个脱氧核苷酸连接到DNA片段上，形成磷酸二酯键（a处），B正确；C、解旋酶作用于氢键（b处），C正确；D、DNA连接酶作用于磷酸二酯键（a处），而不是普通磷酸键（c处），D错误．故选：D．
