乙炔( H,)抑制法是测定反硝化速率最常用的方
法[ .C2H2能抑制N2O还原成N2,Srensen等利用此
原理提出了测定沉积物反硝化率的方法,称之为乙炔
抑制技术(AIT)[6].乙炔抑制法具有快速,灵敏,价格
低廉等优点,能够同时测定系统中NO 一的还原率,在
尽量保持沉积环境的原位状态下研究水一沉积物界面
NO 一的分布范围,使物理扰动减至最小水平,获得比
较准确的结果,因此乙炔抑制法在湖泊,海洋生态系统
水一沉积物界面氮迁移动态研究中得到了广泛的应
用[ . 本文采用乙炔抑制法,对北黄海反硝化作用及影
响因素进行了研究,以期为深入研究反硝化过程在近
海氮循环中的作用提供参考.
1材料与方法
1.1样品采集
1.1.1站位布设 于2006年6月,乘"东方红2号"综
合调查船,在北黄海120.59 E~123.E,37.27 N~38.57 N
海区选取8个站位进行现场采样和模拟研究,采样站位
见图1.
图1采样站位
Fig.1 The sampling stations
1.1.2样品采集 用箱式采泥器采集垂直无扰动泥
样约15 cm,同时采集底层海水用于现场模拟培养实
验.所有采样器械,容器和培养装置均经灭菌或消毒
处理.
1.2现场培养
采集的沉积物样和水样迅速进行现场模拟培养实
*基金项目{国家重点基础研究发展计划项目(2006CB400602);物理海洋教育部重点实验室开放课题基金项目(200302);山东省环保重点基金项
目(2004040 1)资助
收稿日期:2007 04 04;修订日期:2007 06 05
作者简介:白洁(1962 ),女,博士,教授,主要从事海洋微生物生态及对氮循环作用研究.E mail:baijie@ouc.edu cn
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中国海洋大学学报
验,培养采用直径14 cm,高45 cm的有机玻璃柱.取
上层无扰动10 cm沉积物放入柱中,注入现场底层海
水,用灭菌液体石蜡封口,以保持厌氧环境.实验过程
中用恒流泵保持水体循环,以使营养盐和细菌均匀分
布,培养模拟现场温度进行.实验组分别向上覆水和
沉积物中注入乙炔,以达到乙炔饱和状态,同时设非乙
炔抑制对照组.在培养过程中定时采集水样装入玻璃
瓶中,加入饱和氯化汞固定,密封低温保存,用于氧化
亚氮测定和计算反硝化速率.
1.3样品分析
氧化亚氮采用顶空分析法,用HP5890 1I型气相色
谱仪进行测定.
营养盐采用德国布朗一卢比AA3型营养盐自动分
析仪进行测定.
DO采用YSI6600型溶氧仪在现场测定.
水温,盐度,pH值等采用PCD6500多参数水质仪
在现场测定.
1.4反硝化速率的计算
沉积物反硝化速率通过计算N2O气体通量获得,
计算采用王东启等的方法进行L2]:
F:H×10—0×(Af/At)
式中:F为反硝化速率[/,mol/(m h)],H为培养
柱净高度(m),Ac/A£为柱内N2O浓度随时间的变
化率[vmol/(L h)].
铵氧化抑制法、硝酸氧化抑制法和同位素稀释法